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原理及適用範圍
金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus簡稱金葡菌)是人類最常見的致病菌之一,其侵襲力很強,能產生多種致病物質如:腸毒素、凝固酶等;可引起化膿性炎症、毒素性疾病及葡萄球菌性腸炎。金葡菌所引起的中毒事件已成為世界性的公共衛生問題,我國每年由金葡菌引起的食物中毒事件屢有報道。金黃色葡萄球菌測試片(Staph Count Plate )運用微生物測試片專有技術,做成一次性快速檢驗產品,一步培養15-24h就可確定出病原菌的存在與否,大大地簡化了檢測程序。本品對於提高衛生行政監督部門對食源性疾病的監測能力和預警能力,以及應對細菌性食物中毒突發公共衛生事件中的反應能力具有重要的作用,同時也可在食品生產企 業使用。
操作方法
樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225 mL滅菌生理鹽水的取樣罐或均質杯內,製成1:10的樣品勻液。
接種:將金黃色葡萄球菌測試片置於平坦實驗台面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然後再將上層膜緩慢蓋下,靜置5min使培養基凝固,最後用手輕輕地壓一下,每個樣品接種兩片。
培養: 將測試片疊在一起放回原自封袋中,透明面朝上水平置於恆溫培養箱內,堆疊片數不超過12片。培養溫度為36℃±1℃, 培養15~24h。
結果判讀
紫紅色的菌落為金黃色葡萄球菌;呈藍色的菌落為其他大腸菌群。出現陽性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進行驗証,沒有條件的話至少再取樣重複檢驗一次。
附加說明
1、有關驗証試驗表明,金黃色葡萄球菌測試片接純菌種可以產生典型的紫紅色菌斑,普通大腸桿菌呈藍色菌落,而沙門氏菌,變形桿菌在測試片上不生長。測試片的敏感度為1.2×10-8。通過檢測211份糕點、熟肉、鮮肉和奶制品樣品,測試片法和國標法的陽性率分別為10.43%和7.5%(中國衛生檢驗雜誌2007,17(8):1456-1457.)。
2、山東省疾病預防控制中心的驗証結果表明,當金黃色葡萄球菌在0~9個菌落範圍內時,測試片與血平板均能檢出,作為致病菌不得檢出的標準要求,可以作為金黃色葡萄球菌檢驗應用。
3、注意使用過的測試片上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。
4、該測試片的使用方法可參考中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業標準《食品中金黃色葡萄球菌快速計數法--PetrifilmTM 測試片法》(標準號為:SN/T 1895-2007)
保存條件
本品需存放在4~10℃冰箱中,保質期為一年,鋁箔袋打開后,未用完的紙片要放回鋁箔袋中封好,放到冰箱中,一個月內用完。
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